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产品简介：

Trigol 是鼎国开发的针对次生物质含量较少的植物组织和动物组织 RNA 提取产品，

具有更强的裂解能力，并且能有效去除蛋白污染，能够很好的保持 RNA 分子的完整性。

Trigol 可用于小量提取（30~100 mg），又可用于大量（大于 500 mg）。所提取的 RNA

可直接用于 Northern blot、Dot blot、ployA 筛选和分子克隆等。

组成：

编号 成分 规格

NEP019-1 Trigol 50 ml

NEP019-2 Trigol 100 ml

实验前准备

1、准备 RNase-free 枪头，离心管。

2、准备 RNase-free ddH 2 O、TE buffer 或 0.5%SDS。

3、使用 RNase-free ddH 2 O 配制 75%无水乙醇。

4、三氯甲烷，异丙醇。

储存条件：

4℃避光保存。

步骤：

一、材料处理：

1. 液氮研磨，将组织直接放入研体中，加入液氮，迅速研磨。按 30~100 mg 组织/ml

Trigol 加入 Trigol，转入离心管进行第 2 步操作。

2. 匀浆：组织样品按 30~100 mg/ml Trigol 加入Trigol，另外，组织体积不能超过Trigol

体积的 10%，否则匀浆效果会不好，用电动匀浆器充分匀浆约需 1~2 min。

二、操作步骤：

1. 细胞或组织加 Trigol 后，室温放置 5~10 min，使其充分裂解。

注：此时可放入-70 ℃长期保持。

2. 12000 rpm 离心 5 min，弃沉淀。

3. 按 200 μl 氯仿/ml Trigol 加入氯仿，振荡混匀，室温放置 15 min。

1 ）禁用漩涡振荡器，以免基因组 DNA 断裂。

2 ）样品若蛋白含量较高，可重复抽提一次。

4. 4℃ 12000 rpm 离心 15 min。

5. 吸取上层水相，至另一离心管中。

1) 千万不要吸取中间界面。

2) 若同时提取 DNA 和蛋白质，则保留下层酚相存于 4 ℃冰箱，若只提 RNA，则弃下

层酚相。

，则弃下

层酚相。

6. 加入吸入上清量的 0.7~1 倍体积的异丙醇，室温放置 10~30 min。

7. 4℃ 12000 rpm 离心 10 min，弃上清，RNA 沉于管底。

8. 按 1ml 75%乙醇/ml Trigol 加入 75%乙醇，温和振荡离心管，悬浮沉淀。

9. 4℃ 12000 rpm 离心 5 min，尽量弃上清。

10. 室温晾干或真空干燥 5~10 min。

RNA 样品不要过于干燥，否则很难溶解。

11. 可用 50 μl ddH 2 O、TE buffer 或 0.5%SDS 溶解 RNA 样品， 放置 5 min。

ddH 2 O 、TE 或 0.5%SDS 均须用 DEPC 处理并高压。