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SDS-PAGE 快速 凝胶配制试剂盒
编 编 号： WB- - 0211
规 规 格：制 可制 40-60 块凝胶
产品简介： ：
本公司生产的 SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒提供了配制 SDS-PAGE 凝胶所需的大部分试剂，用
户只需自备制胶器具和蒸馏水，即可配制 PAGE 胶。SDS-PAGE 凝胶配制试剂盒不仅可用于配制
SDS-PAGE 凝胶，也可用于配制非变性 PAGE 凝胶。
包装清单： ：
2xSDS 蛋白上样缓冲液（赠品） 2ml
30%丙烯酰胺混合液 100ml
4×SDS-PAGE 分离胶缓冲液 80ml
4×SDS-PAGE 浓缩胶缓冲液 30ml
过硫酸铵 0.5g
TEMED 0.5ml
说明书 一份
保存条件： ：
为了保证产品质量，收到试剂盒之后请按如下方式保存：
（1）TEMED(避光)室温保存。
（2）30%丙烯酰胺混合液、2×SDS 蛋白上样缓冲液 4℃保存，2×SDS 蛋白上样缓冲液如有沉淀
析出，37℃加热溶解。
（4）4×SDS-PAGE 分离胶缓冲液、4×SDS-PAGE 浓缩胶缓冲液室温或 4℃保存，如有沉淀析出，
37℃加热溶解。
（3）过硫酸铵用 5ml 双蒸水溶解配制成 10%溶液后，分装成小管-20℃保存，通常半年内有效。
10%过硫酸铵水溶液在室温状况下不稳定，4℃可以保存 3-5 天。
注意事项
10%过硫酸铵水溶液不太稳定，需注意存放条件和时间限制。如发现凝胶聚合不好，应更换配
制的过硫酸铵溶液。
使用说明：
根据目的蛋白的分子量大小选择合适的凝胶浓度，再按照下面的表格配制SDS-PAGE的分离胶(即下层胶)。
SDS-PAGE 分离胶的浓度与最佳分离范围：
SDS-PAGE 分离胶浓度 最佳分离范围
6%胶 57-212kD
8%胶 36-94kD
10%胶 20-80kD
12%胶 12-60kD
15%胶 10-43kD
配制 6%的 PAGE 分离胶
成分 所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积 5 10 15 20 30 50
蒸馏水 2.7 5.4 8.1 10.8 16.2 27
30%丙烯酰胺混合液 1.0 2.0 3.0 4.0 6.0 10.0
4×SDS-PAGE 分离胶缓冲液 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%过硫酸铵 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.004 0.008 0.012 0.016 0.024 0.04
配制 8%的 PAGE 分离胶
成分 所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积 5 10 15 20 30 50
蒸馏水 2.4 4.7 7.1 9.5 14.2 23.7
30%丙烯酰胺混合液 1.3 2.7 4.0 5.3 8.0 13.3
4×SDS-PAGE 分离胶缓冲液 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%过硫酸铵 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.003 0.006 0.009 0.012 0.018 0.03
配制 10%的 PAGE 分离胶
成分 所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积 5 10 15 20 30 50
蒸馏水 2.0 4.1 6.1 8.1 12.2 20.3
30%丙烯酰胺混合液 1.7 3.3 5.0 6.7 10.0 16.7
4×SDS-PAGE 分离胶缓冲液 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%过硫酸铵 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02
配制 12%的 PAGE 分离胶
成分 所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积 5 10 15 20 30 50
蒸馏水 1.7 3.4 5.1 6.8 10.2 17.0
30%丙烯酰胺混合液 2.0 4.0 6.0 8.0 12.0 20.0
4×SDS-PAGE 分离胶缓冲液 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%过硫酸铵 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02
配制 15%的 PAGE 分离胶
成分 所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积 5 10 15 20 30 50
蒸馏水 1.2 2.4 3.6 4.8 7.2 12.0
30%丙烯酰胺混合液 2.5 5.0 7.5 10.0 15.0 25.0
4×SDS-PAGE 分离胶缓冲液 1.25 2.5 3.75 5.0 7.5 12.5
10%过硫酸铵 0.05 0.1 0.15 0.2 0.3 0.5
TEMED 0.002 0.004 0.006 0.008 0.012 0.02
3. 按照如下表格配制 SDS-PAGE 的浓缩胶(也称上层胶、积层胶或堆积胶)
配制不同体积 5%的浓缩胶
成分 所需各成分的体积(毫升)
凝胶体积 2 3 4 6 8 10
蒸馏水 1.17 1.75 2.33 3.5 4.7 5.8
30%丙烯酰胺混合液 0.33 0.5 0.67 1.0 1.3 1.7
4×SDS-PAGE 浓缩胶缓冲液 0.5 0.75 1 1.5 2 2.5
10%过硫酸铵 0.02 0.03 0.04 0.06 0.08 0.1
TEMED 0.002 0.003 0.004 0.006 0.008 0.01
注意事项
10%过硫酸铵的水溶液不稳定，每次取用后应立即放回冰箱，尽量减少室温存放时间，以防失效。如发现凝胶聚合不好，应考虑丢弃使用过的 10%过硫酸铵，更换新配制的 10%过硫酸铵。另外 PAGE 凝聚的速度和温度及催化剂的用量关系密切，在其它条件不变的情况下，可通过改变TEMED 的用量，控制 PAGE 凝胶的聚合速度，凝胶聚合过快不利于操作。操作中，特别是液体的混匀应尽量避免气泡的产生。
未聚合的丙烯酰胺有毒，为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。
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