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淋巴细胞分离液使用说明书

Lymphocyte separation liquid

一：科研级淋巴细胞分离液

产品编号 产品名称 产品规格 密度 g/ml

GS3701-100ML 人外周血淋巴细胞分离液 100ml 1.077

GS3702-100ML 小鼠外周血淋巴细胞分离液 100ml 1.092

GS3703-100ML 大鼠外周血淋巴细胞分离液 100ml 1.083

GS3704-100ML 兔外周血淋巴细胞分离液 100ml 1.0965

GS3705-100ML 猪外周血淋巴细胞分离液 100ml 1.11

GS3706-100ML 豚鼠外周血淋巴细胞分离液 100ml 1.085

GS3707-100ML 鸡外周血淋巴细胞分离液 100ml 1.078

成分：泛影酸葡甲胺和右旋糖苷及氯化钠等配制而成的灭菌水溶液。

储存：运输和储存中应在 18-25℃避光保存，启封后贮存于冰箱避免微生物污染。

二：操作步骤

A：使用离心管分离

1：取一支 15ml 离心管，加入 3-5ml 分离液。

2：取新鲜抗凝血 1ml，用 PBS 或 Hank’s 液按 1:1 稀释混匀。用吸管或移液器吸取血

液样本小心加入到分离液液面上，血液要沿管壁缓缓加入，使两液面间保持清晰

界面。离心（2000 转 / 分或 400g)20-30min。

3：离心后，小心取出离心管，此时离心管由上至下分为四层：第一层：血浆或组织

匀浆液层；第二层：环状乳白色淋巴细胞层；第三层：透明分离液层；第四层：

红细胞层。

4：收集血浆和分离液之间的第二层：用吸管或移液器小心吸取第二层环状乳白色淋

巴细胞层到另外一支 15ml 离心管中，加入 10mlPBS 清洗液，混匀细胞。

5：离心（2000 转 / 分或 400g)10min。弃上清。

6：加入 5mlPBS 清洗液，混匀细胞，离心（2000 转 / 分或 400g)10min。弃上清。

7：重复第 6 步一次，沉淀即为所需淋巴细胞。

注：（1）如果血液样本量大于3ml，根据血液量，增加淋巴细胞分离液的量，一般取稀释后血液量1-3

倍的分离液。

（2）分离血液样本量大时（＞10ml），取新鲜抗凝血（2000转/分或400g)离心20min弃去血浆。

取弃血浆的血细胞中加入 PBS 稀释混匀。

B：使用淋巴细胞分离管分离

1：加入淋巴细胞分离管筛板刻度处等量分离液，离心（2000 转 / 分或 400g)30s。

2：取新鲜抗凝血 1ml，用 PBS 或 Hank’s 液按 1:1 稀释混匀。将混匀的抗凝血稀释液

加入分离管中，此时抗凝血位于筛板上方。离心（2000 转 / 分或 400g)20-30min。

3：离心后，取出分离管，紧挨着筛板上方的即为环状乳白色淋巴细胞层。此时分离

管由上至下分为四层：第一层：血浆层；第二层：环状乳白色淋巴细胞层；第三层：

透明分离液层；第四层：红细胞层。

4：将筛板上层液体直接倒入另一 15ml 离心管中，离心（2000 转 / 分或 400g)10min，

弃上清，收集淋巴细胞； 血浆层如果较多，可先吸取部分血浆，再将筛板上层剩

余液体倒入另一离心管中；如果血浆层有颗粒杂质，建议用吸管或移液器吸取淋

巴细胞层。

5：加入 10mlPBS 清洗液，混匀细胞。

6：离心（2000 转 / 分或 400g)10min。弃上清。

7：加入 5mlPBS 清洗液，混匀细胞，离心（2000 转 / 分或 400g)10min。弃上清。

8：重复第 6 步一次，沉淀即为所需淋巴细胞。

三：注意事项：

1：启封后应置于 4℃保存避免微生物污染。

2：细胞分离液从冰箱取出后，不可立即使用，需待溶液温度升至室温时，摇匀后使用。

3：整个分离过程温度应控制在 18-28℃，后续试验如果要进行细胞培养，请在无菌环

境中进行整个操作。

4：未启封前置于 10℃以下易出现结晶，影响分离效果。