新型 DNA 凝胶电泳荧光染料—— 代替 EB
—— 特别适于定量 PCR 检测的 SYBR®Green I 核酸染料
采用琼脂糖电泳或聚丙烯酰胺电泳方法检测双链 DNA 时,SYBR®Green I 是最灵敏的荧光染料,当其
结合到核酸上时,会产生很强的荧光及高量子产额,DNA/SYBR®Green I 复合物的量子产额约为 0.8。由于
与核酸结合后能产生很强的信号,背景极低,并且对核酸的亲和力高,因此 SYBR 染料可在低浓度条件下
使用。SYBR®Green I 的最低检出限:20pg DNA(254nm);60pg DNA(300nm 紫外透射);此外,SYBR®Green
I 还可以用于检测寡核苷酸(1-2ng,300nm 紫外透射),比 EB 灵敏 20 至 100 倍。
SYBR®Green I 用于电泳检测 DNA 时,既可预染,也可电泳后再进行染色。SYBR®Green I 用于琼脂
糖电泳检测 DNA 后,可直接将 DNA 转移至膜上,进行后续核酸印迹杂交反应。此外,SYBR®Green I 与
DNA 的结合对多种常用的限制性内切酶活性无抑制作用,可直接进行消化或连接。
SYBR®Green I 主要用于溶液中 DNA 的定量,特别适用于荧光定量 PCR 检测(即实时 PCR)。
SYBR®Green I 原液是无水 DMSO 配制 10,000 倍浓缩液。配制工作液时需用 TE 或灭菌双蒸水。
SYBR®Green I 应避光存放,原液保存于-20℃;最好存于密封聚丙烯容器。
图示为 DNA 分子量标准电泳 SYBR GREEN I 染色图。
本品原液为美国 MP 公司生产
编号 品名 规格
DH392-1 SYBR Green I Loading buffer 500μl 工作液
DH392-2 SYBR Green I 10000×,DMSO 50μl 原液
DH392-3 SYBR Green I 10000×,DMSO 100μl 原液
DH392-4 SYBR Green I 10000×,DMSO 1ml 原液
使用说明:
1. 用于琼脂糖凝胶电泳:取原液 1μl 加入 TE 缓冲液或灭菌双蒸水
1ml 混匀,再加入 6×loading buffer 上样缓冲液 1ml 混匀,(此时
溶液为 1:2000 稀释 ,即为工作液)电泳时取 1-2µl 工作液和
5µl 电泳样品混匀后直接上样,如果电泳样品小于 200bp 可以适当
增加工作液的用量。
建议:客户可将工作液小量分装,避光保存于-20℃。
2. 用于荧光定量 PCR:取原液 1μl 加入 TE 缓冲液或灭菌双蒸
水 1ml 混匀。推荐:25μl 反应体系加稀释液 1μl(客户可根
据自身情况做相应调节)。
建议:客户随用随配,避光保存于 4℃。
3. DH392-1 为鼎国实验室所配工作液,用户只需 5-8μl 样品加 1-2μl 工作液(含溴酚兰)混合即可上样,
如果电泳样品小于 200bp 可以适当增加工作液的用量。
建议:客户可将工作液小量分装,避光保存于-20℃。