SYBR Green PCR Premix HS Taq(Real Time)
产品编号:GR1201-1ML / GR1201-5ML
产品规格:50μl 反应×40T/50μl 反应×200T
特点:扩增效率高,特异性好,保存稳定。
产品简介:
本产品是采用 SYBR® Green I 嵌合荧光法进行 Real Time PCR 的专用试剂,已
含有 SYBR® Green I。是一种 2×Premix 试剂,配制 PCR 反应液时只需加模板、引
物及补充 ddH 2 O 即可,大大简化了操作过程, 减少了整个操作过程中的污染。操作
简便,实验数据可靠。
制品中使用了公司最新研制的 Hot Start Taq DNA 聚合酶,可以有效抑制非特异性的 PCR
扩增,大大提高 PCR 的扩增效率,可进行高灵敏度的 Real Time PCR 反应。
产品特点:
适用于 Real Time PCR 反应,可以对目的基因准确地进行检测、定量。
2×Premix,混有热启动 DNA 聚合酶,dNTPs,SYBR Green I,在配置 PCR 反应液时,只
需加入模板、引物、灭菌双蒸水就可以进行 Real Time PCR 反应,使用非常方便。
DNA 聚合酶使用了改良后的热启动酶,优化的 buffer 系统,具有扩增效率高、特异性好
的特点。
产品用途:
适用于 Real Time (荧光定量)PCR 反应。
产品储存:-20 ℃
本品若长期放置,请分装后置于-20℃避光保存。若经常使用,请 4℃避光保存,4℃保存 3
个月,扩增效果良好。
产品注意:
本品内的所用试剂只用于科学研究,不可应用于诊断或者临床实验。使用时,请严格遵守
实验室安全操作。
适用仪器:
ABI PRISM ® 7000,7700 和 7900 系列; LightCycle ® 系列; Bio-Rad
产品主要组份:
HS Taq DNA Polymerase; 2 ×反应缓冲液;3 mM MgCl 2 ;0.4 mM dNTPs;
2×SYBR GreenⅠ;PCR 优化剂
模板的要求:
RNA 模板:本品不适用于一步法 RT-PCR,请将 RNA 模板反转录为 cDNA 后进行
PCR 扩增。对模板浓度要求不高,建议稀释 cDNA 用。建议采用我公司 cDNA 第一
链合成试剂盒(产品编号:TER016-1 和 TER016-2)。
DNA 模板:本品适用于 DNA 直接定量 PCR 扩增。模板 DNA 应无蛋白、RNA 等杂
质污染,体系中 DNA 量在 1~10ng 左右。纯化 DNA 可采用 Genview 核酸纯化系统:
高效离心柱型 DNA 产物纯化试剂盒(产品编号:GV-PCR-P-50 或高效离心柱型琼
脂糖凝胶 DNA 回收试剂盒(产品编号:GV-GX-50)。
实验例操作(ABI PRISM®7700 )
PCR 反应体系(以小鼠组织 cDNA 为模板,扩增 318bp β-actin 的片段,25 μl 反应体系)
cDNA 模板 0.μl~
PCR 循环
94℃ 3 min
94℃ 30 s
63℃ 30s 35-40 cycles
72℃ 30s
β-actin F(10 μM) 0.5 μl
β-actin R(10 μM) 0.5 μl
2×SYBR Green PCR Premix HS Taq 12.5 μl
H 2 O(DNase free) 补足 25μl
注意:
退火温度只针对实验例引物及模板。用户需根据实际引物的 Tm 值确定实验退火温
度。
引物设计请参照荧光定量 PCR 引物设计原则设计。
上机前建议普通 PCR 扩增,确定扩增条件及 Tm 值,使用荧光定量 Mix 上机退火温
度,应在普通 PCR 扩增退火温度基础上提升 5℃。
严格采用荧光定量 PCR 仪软件操作。
PCR 请选择专门用于荧光定量的 PCR 管。可选择 Genview 0.2ml 八联排乳白 PCR