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考马斯亮蓝快速染色液

产品编号：WB-0105

产品规格：100ml

产品简介：

考马斯亮蓝快速染色液(Commassie Blue Fast Staining Solution)是以考马斯亮蓝 G250 为

染料，可用于 SDS-PAGE 或非变性 PAGE 等蛋白凝胶的快速、高灵敏染色，或 Western 转膜

后 PAGE 胶上残余蛋白的检测。

考马斯亮蓝快速染色液是一种无毒，无刺激性气味的高度环保型染色液。普通的常规方

法需使用甲醇及强刺激性的乙酸，考马斯亮蓝快速染色液则采取全新配方，实现了染色时的

无毒和无刺激性气味。

本考马斯亮蓝快速染色液只需一小时或更短时间就可以轻松检测到低达 30-100ng 的蛋

白电泳条带，凝胶后续经去离子水洗涤降低背景后最低可以检测到 5-10ng 的蛋白条带。

保存条件：室温密封保存。

使用方法：

一、常规染色：

1、洗涤：电泳结束后，取胶放入约 100ml 去离子水中，在侧摆或水平摇床上摇动 5min，弃

液体，再重复两次，共洗涤三次。

注：本洗涤步骤的目的是为了洗去凝胶中的 SDS 等干扰物质。如果不能充分去除 SDS

会导致背景较高。

2、染色：弃去离子水，加入适量的考马斯亮蓝快速染色液(每块大小约 8×8 厘米的凝胶需

使用约 20ml)，使染色液能盖住凝胶，且液面至少高出三个胶的厚度为宜，室温在侧摆

或水平摇床上进行染色。推荐的室温(20-25℃)染色时间为 1h，实际染色时间可以根据染

色效果自行调整，通常可以在 15-120min 范围内进行调整。室温染色超过 120min 通常染

色效果不会进一步改善。染色至能看到清晰的目标蛋白条带后，弃染色液，加入适量的

去离子水，停止染色反应。然后即可拍照记录。

注：根据蛋白量的多少，蛋白量大的条带在染色后 10-30min 左右会出现，大部分蛋白

条带会在 1h 内出现。

3、脱色(可选做)：如果希望获得更加清晰的蛋白条带，可以加入约 100ml 去离子水室温洗

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涤约 1h 甚至过夜。通过去离子水洗涤可以进一步降低背景，获得更好的染色效果。对于

去离子水浸泡过夜的已经进行了染色的凝胶，再次进行考马斯亮蓝快速染色液染色和洗

涤可以进一步改善染色效果，获得更好的考染蛋白条带。

注：上述的洗涤、染色和脱色时间均适用于 0.75-1.5mm 厚的凝胶，对于更厚的凝胶，

洗涤、染色和脱色的时间均需适当延长。

二、快速染色：

1、电泳结束后，取胶放入约 100ml 去离子水中，煮沸 30-60s，浸泡 5min。

2、弃去离子水，加入适量的考马斯亮蓝快速染色液(每块大小约 8×8 厘米的凝胶需使用约

20ml)，使染色液能盖住凝胶，且液面至少高出三个胶的厚度为宜，煮沸 30-60s，浸泡

5min。染色至能看到清晰的目标蛋白条带后，弃染色液，加入适量的去离子水，停止染

色反应。然后即可拍照记录。

3、如果希望获得更加清晰的蛋白条带，可以加入约 100ml 去离子水煮沸 30-60s，浸泡 5min。

注意事项：

1、本染色液呈酸性，有轻微腐蚀性，使用时请作必要防护。

2、需自备去离子水。如无去离子水，也可以使用双蒸水。

3、如果使用微波炉加热，请特别注意避免沸腾。以免因暴沸而导致凝胶碎裂。

4、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

常见问题：

1、无染色条带：可能上样量太少，建议电泳时加适当量的 BSA 等作为阳性对照。

2、背景太高：可能杂质没有除尽，建议延长最初的去离子水洗涤时间或增加洗涤次数。也

可以在完成染色后，把凝胶放置在去离子水中在室温进行洗涤。在去离子水中浸泡过夜，

通常可以取得较好的脱色效果。

3、染色条带的灵敏度不够理想：可以使用考马斯亮蓝快速染色液进行第二次染色，再次染

色可以改善染色效果。在加热情况下染色可以显著提高检测灵敏度，另外染色后在室温

或 4℃用去离子水进行脱色也可以显著改善染色的灵敏度。