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MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒（比色法）提供了最优化的缓冲液和试剂，运用

比色度的方法，通过检测微孔板上5-hmC的水平，以定量检测全基因组的DNA羟甲基化

水平.而没有甲基化和未甲基化胞嘧啶的结合活性.本试剂盒与MethylFlash DNA羟甲基化

定量试剂盒（比色法）能够完美配合，用来同时定量检测DNA的甲基化和羟甲基化水平.

MethylFlash甲基化DNA定量试剂盒（比色法）是我们以前的Methylamp全基因组DNA

甲基化定量试剂盒的改进版，简化了工作流程，去掉了平板干燥和阻断两个步骤，并提高

了结果的稳定性.本试剂盒使用了一种新的方法把背景信号降到最低，并去掉了平板干燥和

阻断两个步骤.与基于套色板的方法相比（比如HPLC或者质谱），本产品检测5-mC更加

划算和精确.试剂盒有以下优点和特征：

试剂盒中的新成分将背景信号降至最低，不对平板进行模块化，分析操作更简单，结果更

精确可靠，也更稳定.

优化的抗体和加强溶液，能高度专一的识别5-mC，而不会与未甲基化的胞嘧啶结合，在

特定浓度的DNA样品中几乎不会结合羟甲基化的胞嘧啶.

MethylFlash羟甲基化DNA定量试剂盒（比色法）中含有定量检测全基因组羟甲基化所必

需的所有试剂.在检测实验中，DNA被固定在一种有DNA吸附能力的孔上，羟甲基化的片

段会被捕获剂以及检测抗体识别，用分光光度计读取微孔板在450nm处的比色度定量.羟

甲基化的DNA的量与OD值成线性关系，可以通过本试剂盒提供的方程来计算两种不同的

羟甲基化DNA样品的相对羟甲基化状态或者通过标准曲线完全定量5-mc.基于其工作原理

和微孔板模式，本试剂盒可以用于各种物种来源的多种样品形式，包括培养的细胞、新鲜

和冷冻的组织、石蜡包埋组织、血浆/血清样品以及体液样品.本试剂盒曾经对来自小鼠大

脑和海拉细胞系的样品成功地进行了5-hmC的定量，所得到的结果与用HPLC和LC-MS的

方法相当.通过使用本试剂盒，研究者们首次在正常人类脑部组织和结肠组织中发现了高丰

度的5-hmC.同时，研究结果还显示，正常人类脑部组织和结肠组织中5-hmC分别占总甲

基化胞嘧啶（5-mC和5-hmC的总和）的32%和16%.相反，在结肠癌细胞系（HCT116）

和宫颈癌细胞系（HeLa）中，5-hmC的比率很低，几乎没有.该羟甲基化DNA定量试剂盒

（比色法）内主要产品组份包括：HC1 （10X Wash Buffer） HC2 （Binding Solution）

HC3 （Negative Control I， 20 ug/ml） HC4 （Negative Control II， 20 ug/ml）

HC5 （Positive Control， 20 ug/ml） HC6 （Capture Antibody， 1000 ug/ml HC7

（Detection Antibody， 400 ug/ml） HC8 （Enhancer Solution） HC9

（Developer Solution） HC10 （Stop Solution） 8-Well

Assay Strips （With Frame） 用户指南手册 * Spin the solution down to the bottom

prior to use. Note: The HC3 Negative Control I is an unmethylated polynucleotide

containing 20% of cytosine. The HC4 Negative Control II is a methylated

polynucleotide containing 20% of 5-methylcytosine. The HC5 Positive Control is

a hydroxymethylated polynucleotide containing 20% of hydroxymethylcytosine.

1、整个比色法检测实验的操作简单易学，方便快捷，只需要3小时45分钟就能完成实验.

96孔板模式让您可以根据自己的需要地选择用手工或者高通量；2、试剂盒中提供通用

阳性和阴性对照，能用于定量检测各种来源的DNA样品中的羟甲基化状态，包括哺乳动

物、植物、真菌、细菌以及病毒；3、试剂盒中含有定量检测全基因组DNA羟甲基化实验

所有用到的试剂，包括阳性和阴性对照.直接测定比色度的方法来进行定量检测取代了已

过时的和劣质的方法，无须DNA消化/变性、提取，不用使用套色版，不接触放射性材料；

4、本试剂盒用到的新方法和专利试剂使得羟甲基化DNA定量实验结果精确、高度灵敏特

异，检测极限为40 pg的羟甲基化DNA，检测范围宽至40 pg 到 20 ng，检测灵敏度是

HPLC的十倍（0、008% vs 0、08%），不与DNA上甲基化或者未甲基化胞嘧啶反应，

专一检测5-hmC.